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自动液相色谱分离层析仪是否一定要评价柱效?
发布时间:2021-10-19   点击次数:54次
  自动液相色谱分离层析仪是从事生命科学研究、药物测定、农业科研、化工、食品科学及大专院校及医疗单位等行业的现代分析实验仪器。
 
  自动液相色谱分离层析仪分离具有紫外吸取物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的一种紫外检测装置,其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸取的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。可直接读出光密度A值,且波长准确度和重复性高、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值,并能计算质量相对的含量。
 
  自动液相色谱分离层析仪配上采集器、恒流泵、部分收集器、梯度混合器、层析柱,即组成一套完整的自动液相色谱分离分析装置,实验室规模层析柱接口完全兼容,不需要任何连接件即可在AKTA等设备系统进行预分离,可满足凝胶渗透层析、亲和层析、离子交换层析等多种色谱分析的使用要求,具有极高的性能价格比。
 
  自动液相色谱分离层析仪是否一定要评价柱效?
 
  总体来说,还是建议进行柱效评价的,但柱效评价标准不能一概而论。
 
  高标准:1)分子筛层析;2)反相层析;3)疏水层析;4)采用阶性梯度或线性梯度洗脱的离子交换层析。此类层析对分离度有较高要求,有些需要采用多梯度洗脱或线性洗脱,如果柱效不佳,往往会造成峰扩散或拖尾,会对纯化效果产生很大影响。
 
  低标准:1)亲和层析;2)采用单梯度洗脱的离子交换层析。此类层析仅需采用单梯度洗脱,有时在产物洗脱下来后,还要马上进行稀释,以防产物聚集,因此对分离度要求较低。然而,过于严重的峰扩散和拖尾,也是会影响纯化效率的,因此柱效测定也*。
 
  仅要求峰型及对称性:流穿模式。此类模式为目标产物流穿,杂质被吸附,如果填料装填不均匀,或者过于松散,仍会导致吸附不匀而影响载量和处理量。因此,评估柱效时建议观察一下峰型及对称性,如果峰型平滑,且对称性良好,即可接受。
 
  建议标准:0.8
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